- Mary Johnson Ph. D.mary at labome dot comSynatom Research, Princeton, New Jersey, United States
- Galet Colette Ph. D.cogalet at gmail dot comUniversité de Californie à Los Angeles, États-Unis
Le sérum est la fraction liquide du sang coagulé d’un fœtus, dépourvue de cellules, fibrine et facteurs coagulants, mais contenant un large nombre de facteurs nutritionnels et macromoléculaires essentiels à la croissance cellulaire. L’albumine sérique bovine est le composant majeur du sérum fœtal bovin (FBS). La multitude de facteurs de croissance présents dans le FBS sont aussi très important car ils sont essentiels au maintien et à la croissance des cultures cellulaires [1] [2]. Le FBS contient également de petites molécules comme des acides aminés, des sucres, des lipides et des hormones. Le FBS est utilisé en culture de cellules eucaryotes et a une large gamme d’applications. Par exemple, il est utilisé en recherche, fabrication, et dans le contrôle de vaccins humains et vétérinaires, et de drogues issues de l’industrie biotechnologique.
Le FBS contient plus de facteurs de croissance et a des taux de gamma globulines (immunoglobulines) faibles. De plus, le FBS contient des quantités plus faibles de compléments que les sérums de nouveaux nés ou d’adulte. Les compléments entrainent la lyse cellulaire en culture et interfèrent avec les essais immunologiques.
Le sérum est préparé après coagulation du sang alors que le plasma contient des anticoagulants et donc contient les protéines impliquées dans la cascade de coagulation.
International Serum Industry Association (www.serumindustry.org), une organisation commerciale des fournisseurs de sérums demande les tests suivants (Table 1), utilisant des méthodes spécifiques, et les résultats doivent être disponibles sous forme du certificat d’analyse.
Test |
---|
bactéries et champignons - tests de stérilité |
Mycoplasmes |
agents cytopathologiques - tests viraux |
agents hemadsorbing - tests viraux |
Virus de la diarrhée bovine - tests viraux |
pH |
osmolarité |
protéines totales, déterminé par la méthode de Biuret |
Endotoxine |
Hémoglobine |
Paterne electrophorétique |
performance individuelle, telle que la culture de cellules souches etc. |
Les endotoxines, aussi appelées lipopolysaccharides (LPS) ou lipooligosaccharides (LOS), proviennent de la membrane externe des bactéries Gram-négative, et contribuent aux manifestations cliniques d’une variété de bactéries Gram-négative pathogéniques, telles que Neisseria meningitidis. In vivo, les endotoxines induisent de la fièvre et une réponse inflammatoire. En culture cellulaire, elles introduisent une grande variation dans la réponse cellulaire.
Le taux d’endotoxines est détecté par le test Limulus amebocyte lysate (test LAL). LAL est préparé à partir du sang de Limulus polyphemus(limule), voir Figure 1. LAL est très sensible aux endotoxines, et coagule en présence de très faibles quantités d’endotoxines. Amebocytes sont les équivalents des globules blancs chez les vertébrés.
Un traitement commun du FBS est l’inactivation par la chaleur où le FBS est chauffé à 56oC pour 30 minutes dans un bain marie avec agitation occasionnelle. Il est important de vérifier que la température du FBS est correcte car chauffer une bouteille de FBS congelé à 56oC peut prendre beaucoup de temps. Le but étant d’inactiver les compléments [5], et éventuellement des inhibiteurs de la croissance cellulaire. L’inactivation par la chaleur peut également avoir des effets indésirables [6]. Une autre application originale de l’inactivation par la chaleur était l’élimination des mycoplasmes. De nos jours, ceci n’est plus un problème car tous les produits sériques sont filtrés avec des filtres dont les pores sont de plus petite taille ce qui permet l’élimination des mycoplasmes. Plusieurs fournisseurs recommandent de ne pas inactiver le FBS par la chaleur pour la plupart des cultures cellulaires. Dans tous les cas, il est préférable d’évaluer le besoin de l’inactivation par la chaleur pour chaque application car différentes cellules présentent des réponses différentes à l’inactivation par la chaleur [7] [8] [9] [10].
Comme tous les autres protocoles concernant le FBS, le procédé d’inactivation par la chaleur doit être appliqué avec précaution car une température trop haute ou une exposition à la chaleur trop longue entrainent une inactivation des facteurs de croissance et la formation de précipités.
Le FBS inactivé par la chaleur de Life Technologies / Invitrogen / GIBCO a été utilisé en culture cellulaire pour étudier UCP-2 et UCP-3 [11], le facteur nucléaire kappa-B [12], l’expression de protéines FMDV de capside dans le système d’expression bacculovirus/vers à soie [13], maladie subclinique greffes-vs-hôte [14], les effets de IFNgamma [15], l’autophagie [16], Le FBS de Thermo Fisher HyClone a été utilisé pour étudier la protéine nucléocapside du coronavirus SARS [17], L’oxyde nitrique [18], l’activine C [19], IE1 [20], Le FBS de chez Sigma a été utilisé pour étudier la hémothérapie [21], et celui d’Equitech-Bio pour étudier la glutathionne S-transférase P [23]. |
Le carbone actif peut lier les molécules lipophiles et a donc été utilisé pour éliminer les hormones telles que les androgènes, l’œstradiol, la progestérone, le cortisol, la testostérone, la T3, et la T4 du FBS. Ces hormones lipidiques sériques ont tendance à interférer avec les essais immunologiques et les méthodes de mesure de l’insuline. Le FCS traité au charbon (csFCS) de Thermo Scientific a été utilisé en culture cellulaire pour identifier les membres de la famille du TGFbeta [24].
La dialyse peut éliminer toutes les molécules de poids moléculaire inférieur à 10,000 MW du FBS. Les petites molécules incluent des composés chimiques polaires et non-polaires. Hormones, cytokines, glucose, acides aminés et beaucoup d’autres sont éliminés.
La Dialyse élimine aussi les antibiotiques et d’autres molécules exogènes du FBS.
Le FBS dialysé de Life Technologies a été utilisé pour étudier la kinésine 5B [25], l’inactivation de la pyruvate kinase M2 [26], celui de Thermo Fisher HyClone pour étudier la mutation de KRAS [27], et le FBS de Sigma pour étudier le métabolisme de PAH [28].
Les irradiations Gamma peuvent faire partie du procédé de stérilisation du FBS. Le FBS est généralement filtré avec des filtres de 0.1 μm plusieurs fois pour éliminer les microorganismes. Les irradiations Gamma peuvent inactiver les virus généralement présents dans l’espèce bovine. Certaines espèces virales sont résistantes aux irradiations Gamma tel que le parvovirus.
Le FBS avec un taux faible d’IgGs est adapté à la production d’anticorps et autres applications.
La culture de cellules souches a des besoins beaucoup plus spécifiques en termes de facteurs de croissance. Certains facteurs de croissance présents dans le FBS induisent la différenciation des cellules souches. Il est donc important de tester des lots spécifiques de FBS pour s’assurer qu’ils permettent le maintien de la pluripotence/totipotence des différents types de cellules souches.
Les principaux pays producteurs de bovins sont les principaux fournisseurs de FBS. Ces pays incluent les USA, l’Australie, la Nouvelle Zélande, le Canada, l’Amérique de Sud et Centrale.
La production et la collecte des produits sériques sont contrôlées par les agences gouvernementales.
Les différents FBS sont étiquetés « USDA-Grade » ou « European-Grade ». Le FBS USDA-Grade sans encéphalopathie spongiforme bovine ou fièvre aphteuse peut être importé dans n’importe quel pays alors que le FBS European-Grade peut être vendu dans la plupart des pays Européens et d’Asie.
Le FBS peut être stocké congelé entre -5 et -20 oC, et peut être décongelé entre 2 et 8 oC. Il est conseillé d’aliquoter le FBS dans des tubes de 50ml pour éviter les cycles congélation/décongélation.
Après décongélation, il est courant d’observer des précipités dans le FBS du fait de la dénaturation des protéines sériques. Les précipités peuvent être facilement éliminés par une brève centrifugation, ceci n’affecte pas la qualité du sérum.
Beaucoup de compagnies fournissent du FBS de différents pays, de qualité différente, et traité différemment. Le FBS est lui-même un mélange complexe, des différences entre les différentes qualités de FBS et les différents fournisseurs sont donc attendues.
Il est donc essentiel d’établir un procédé pour sélectionner et évaluer le FBS. Une considération importante est de revoir la littérature pour un FBS particulier dans un champ de recherche similaire ou pour le même type de culture cellulaire.
Labome a revu 193 publications pour l’utilisation du FBS.
Les publications représentent un sous-ensemble aléatoire de 10,000 publications revues par Labome. Elles proviennent de journaux en accès libre des années 2006 à 2011.
Les fournisseurs principaux de FBS sont Life Technologies, Thermo Scientific HyClone, and Sigma-Aldrich (Table 2).
Fournisseur | num | |
---|---|---|
Life Technologies | 82 | |
Thermo Scientific HyClone | 40 | |
Sigma-Aldrich | 22 | |
Gemini Bio-Products | 9 | |
Atlanta Biologicals | 6 | |
PAA Laboratories | 6 | |
PAN Biotech | 3 | |
Biological Industries | 2 | |
Omega Scientific | 2 | |
autres | 21 |
Life Technologies est une compagnie de biotechnologie dont le siège est à Carlsbad, Californie. Elle a été formée en 2008 avec la fusion d’Invitrogen Corporation et Applied Biosystems Inc. Sa marque, GIBCO, fournit des produits pour la culture cellulaire comme les milieux de culture, le FBS et autres produits utilisés en culture cellulaire. En Mars 2012, Il y avait environ 34 types de FBS.
La revue de Labome indique que le FBS de GIBCO a été utilisé dans 42% des publications (82 sur 193). La table 3 détaille le nombre de publications citant le FBS de GIBCO par secteur de recherche.
Secteur de recherche | num |
---|---|
Physiologie | 32 |
Immunologie | 18 |
Oncologie | 18 |
Pathologie | 7 |
Neuroscience | 6 |
Virologie | 1 |
Physiologie représente le secteur de recherche le plus populaire. La plupart des publications se concentrent sur les fonctions de gènes dans les processus physiologiques. Par exemple, différents FBS ont été utilisés pour étudier l’expression de l’albumine dans les cellules micro gliales humaines et dans le tissu cérébral [29], la fonction de la O-mannosyl phosphorylation de l’alpha-dystroglycan dans la liaison à la laminine [30], le nouveau rôle du résidu D70 de APE1 dans le taux d’excision des extrémités 3’ bloquantes [31], le rôle de CENH3 dans la formation des centromères chez la Drosophile [32], les isoformes d’IGF1 et leurs fonctions [33], le rôle des diols dans la voie de signalisation de l’oxyde nitrique [34], l’effet de PKC dans la protection induite par le pré conditionnement à l’isofluorane [35], la régulation du réseau épigénétique pléiotrope par un facteur en amont de RARalpha [36], Le rôle de l’axe stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) /CXCR4 dans la mobilisation de précurseurs d’ostéoclastes (OCPs) induite par TNF [37], l’effet de la sous-unité alpha de la protéine G liée en C-terminale sur le taux de recyclage [38], les rôles de SRp20 et CUG-BP1dans la modulation de l’épissage alternatif de l’exon 11 du récepteur à l’insuline [39], les effets des facteurs de croissance sur la régulation de l’expression d’ADAMTS-4 [40], L’importance de PRC2 pour maintenir l’identité des cellules ES [41], le rôle du facteur de transcription Ets-1 dans la régulation de l’expression du récepteur A du peptide natriurétique [42], le rôle de H+-ATPase dans la voie de signalisation mTOR [43], l’effet d’ET-1 sur la synthèse et la sécrétion du collagène dans les cellules LC [44], et le rôle du canal potassium mitochondrial Kv1.3 dans l’apoptose induite par Bax dans les lymphocytes [45].
De plus, les différents FBS ont été utilisés pour étudier l’efficacité de certains agents comme les agents immunosuppresseurs locaux [46] et l’inhibiteur de l’histone déacétylase LAQ824 [47]. Certains chercheurs utilisent le FBS pour étudier l’apoptose. Par exemple, Atapattu et al. [48] et Lam et al. [49] ont utilisé le FBS en culture cellulaire pour détailler le processus de l’apoptose. D’autres explorent les mécanismes moléculaires [50] [51] [52] [53] [54] et le rôle de certaines molécules dans les voies de signalisation [55] [56] [57], par exemple, l’interaction entre les jonctions adhérentes basées sur la cadhérine et la voie de signalisation Wnt [56], et le rôle de CHIP dans la voie de l’aggresome [57].
L’immunologie est un autre secteur de recherche populaire. Les différents FBS ont été utilisés pour étudier le rôle of IL-23 dans l’initiation des réponses inflammatoires [58], le rôle de l’IL-23 et l’IL-12 dans la co-activation des voies de signalisation de Dectin-1et TLR [59], l’importance de la reconnaissance de l’inflammasome dans l’immunité adaptive au virus de la grippe [60], L’induction de l’activation immunitaire par des anticorps CD40 agonistes [61], l’immunodéficience de IL-17 conduisant à CMCD [62], le rôle crucial d’IFN pour le recrutement des neutrophiles médié par CCL3 in vivo [63]. Il y avait également des publications se concentrant sur les immunocytes, comme, le rôle de TNF alpha dans les macrophages [64], les effets de SP sur l’expression de la protéine PPAR-gamma dans les monocytes et macrophages [65], le rôle du peptide dérivé de IgG Fc, Tregitopes, dans l’activation des cellules T régulatrices naturelles [66], les rôles des sélectines dans les cellules NK [67]. Certains chercheurs se sont aussi concentrés sur les systèmes immunitaires inné et adaptatif [68] [69]. Récemment, Kendirgi et al. ont étudié un prototype de vaccin ADN linéaire contre le virus de la grippe de type A/H5N1 [70], alors que Li et al. ont étudié un nouveau vaccin contre la fièvre aphteuse [13].
Les différents FBS ont été utilisés pour étudier l’effet de dasatinib sur le mélanome [71], le rôle de celecoxib sur l’expression d’ICAM-1et de VCAM-1 [72], l’expression de Foxp3 dans les cellules cancéreuses humaines [73], l’expression de FAS dans le myélome multiple humain [74], le rôle des cellules négatives pour le récepteur aux androgènes dans le traitement de la métastase osseuse du cancer de la prostate [75], les effets de la pro-drogue O2- (2, 4-dinitrophenyl) 1-diazen-1-ium-1, 2-diolate (JS-K) sur l’invasion du cancer du sein [76], l’influence de la protéine gankyrine sur p53 et Mdm2 [77], l’expression de SOSTDC1 dans les cellules rénales normales et cancéreuses [78], le rôle de NF-kappaB dans la régulation transcriptionnelle de l’oncogène PIK3CA dans le cancer de l’ovaire [79], l’expression et la distribution subcellulaire des isoformes de GFG de rat dans les cellules de gliomes C6 [80], le mécanisme de régulation de GSK3-beta par Aurora kinase A dans les cellules de cancer gastrique [81]. Il y avait également des publications se concentrant sur les thérapies contre le cancer, Par exemple, Barkan et al. ont utilisé le FBS pour étudier le rôle du ciblage du cytosquelette dans l’inhibition de la surcroissance métastatique d’une seule cellule tumorale dormante [82], Sahin et al. ont défini de nouvelles thérapies pour le cancer du sein résistant au trastuzumab en combinant des simulations informatiques, des études expérimentales des résultats de simulation et finalement par concevoir un réseau d'interactions de protéines par ingénierie réverse [83].
Plusieurs groupes ont utilisé le FBS de GIBCO pour leurs recherches en pathologie. Chae et al. ont étudié le rôle d’AQP5 humaine dans la progression de la leucémie myéloïde chronique [84]. Roberts et al. ont étudié les rôles des protéines pUL36 and pUL37 pendant l’entrée du virus herpès simplex type 1 [85]. Konigshoff et al. ont étudié l’expression et l’activité de la voie Wnt/beta-caténine dans la fibrose pulmonaire idiopathique (IPF) [86]. D’autres études en pathologie ont également cité les FBS de GIBCO [87] [88].
Les FBS de GIBCO ont été utilisés pour étudier le rôle de l’œstradiol dans l’activation de la transcription dépendante de la caténine dans les neurones [89], le rôle du facteur neutrophique dérivé du parasite de la maladie de Chagas dans l’expression du gène cholinergique dans les cellules neuronale PC12 [90], le rôle physiologique de dysbindine-1 dans le système nerveux central [91], la régulation de la protéine cartilage acide protein-1B sur les projections axonales [92], et le rôle de NFkappa-B dans l’induction sélective de la nitrique oxyde synthase neuronale dans les astrocytes pendant la stimulation inflammatoire faible avec MPTP [12].
Le FBS de GIBCO a été utilisé pour étudier les interactions entre vaccinia virus p37 et les protéines hôtes associées avec la biogenèse de vésicules de transport dérivées de LE [93].
Thermo Fisher Scientific est le plus grand fournisseur d’instruments et de réactifs dans la recherche scientifique. Au 22 Mars 2012, il avait 19 FBS, avec la marque Thermo Scientific HyClone. Les produits FBS de Thermo Scientific HyClone sont largement utilisés dans la recherche biomédicale. Dans notre revue, 40 des 193 publications ont cité les FBS de Thermo Scientific. La table 4 liste le nombre de publications parmi les différents secteurs de recherche.
Secteur de recherche | num |
---|---|
Physiology | 24 |
Immunology | 5 |
Oncology | 5 |
Virology | 3 |
Neuroscience | 1 |
La physiologie est le secteur de recherche le plus populaire citant les FBS de Thermo Scientific Hyclone. Les différents FBS ont été utilisés pour étudier le rôle pour GDPD5 comme GPC-PDE dans la régulation osmotique de GPC cellulaire [98], la contribution de sites cis flanquant l’élément AP-1 à la régulation basale et dépendante de l’œstrogène de la transcription de BRCA1 [99], les effets de 17beta-E2 sur l’expression et l’activité de la manganèse superoxide dismutase mitochondriale [100], l’accélération de la cicatrisation par auto-assemblage de SAP [101], l’effet du cholestérol PM sur la structure cytosquelettique régulée par PIP2 [102], la régulation de l’activation de PACT par TRBP [103], le mécanisme de down régulation de la synthèse de maspine dans les fibroblastes et myofibroblastes stromales de la cornée humaine [104], le rôle deYKL-40 dans l’activité biologique du FGF [105], La nature biochimique du récepteur à la sérotonine 5HT2c et son rôle dans la transduction du signal [106], le rôle des acides gras saturés dans la réponse aux dommages de l'ADN [107], l’effet de l’antigène large T du virus 40 simien sur l’intégrité du génome et la réponse aux dommages de l'ADN [108], et l’effet de la déformation cyclique et de la déficience en décorine sur les matrices 3-D de collagène cellularisé [109].
Plusieurs papiers se sont concentrés sur le processus d’interaction hôte-microbes. Par exemple, Mendez-Samperio et al. ont utilisé du FBS pour étudier l’effet de Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guérin sur l’expression et la sécrétion de cathelicidine LL-37 dans les cellules épithéliales humaines [110], Round et al. ont conduit des recherches pour étudier le rôle de Bacteroides fragilis dans l’établissement de la symbiose hôte-microbe [111], Vaishnava et al. se sont concentrés sur le mutualisme hôte-microbe [112]. D’autres papiers se sont concentrés sur des études des fonctions de MMP-7 dans le CNS dans un modèle expérimental d’encéphalomyélite auto-immune [113], la fonction de certaines cytokines pro-inflammatoires [114], et le rôle de MDA5 dans le contrôle de l’infection par MNV-1 [115].
Beauvais et al. ont utilisé le FBS pour étudier le rôle de syndecan-1 dans la régulation de l’activation des intégrines alphaVbeta3 et alphaVbeta3 pendant l’angiogenèse et l’oncogenèse [116]. Lee et al. ont étudié la chémothérapie à l’anthracycline dans les tumeurs [117]. Shim et al. ont étudié la régulation et le rôle de l’expression de NAG-1 dans les cellules de carcinome prostatique, PC-3, traitées avec VES [118]. Casalbore et al. ont étudié la relation entre l’activation de TERT et NOTCH1 et le potentiel oncogénique des cellules embryonnaires neurales adultes du bulbe olfactif humain [119].
Seul un papier dans notre revue a utilisé le FBS en neuroscience, pour étudier la libération de END-2 dépendante de l’activité de neurones sensoriels primaires de rat [120].
Schultz et al. ont utilisé le FBS pour tester si IE1 est un activateur transcriptionnel sélectif de gènes dans les étapes précoces de la réplication du bacculovirus [20]. Corti et al. ont testé que de nouveaux anticorps neutralisants pouvaient interagir avec les hémagglutinines de groupe 1 and 2 du virus de la grippe [121]. Han et al. ont utilisé le FBS pour étudier les rôles de l’interaction entre APOBEC3G et APOBEC3F avec un cofacteur endogène dans l’inhibition de la réplication de HIV-1 [122].
Les FBS de Sigma-Aldrich ont été cités dans 22 papiers (voir Table 5).
secteur de recherche | num |
---|---|
Oncologie | 9 |
Physiologie | 8 |
Pathologie | 4 |
Immunologie | 1 |
Neuf papiers se sont concentrés sur l’oncologie moléculaire. Par exemple, les différents FBS ont été utilisés pour identifier les gènes cibles de NF-kappaB impliqués dans le cancer de la thyroïde [126], le rôle critique de l’hypoxie dans l’activation de la MAPK p38 [127], le rôle des Micro-ARNs miR-27a and miR-451 dans la régulation de l’expression de la glycoprotéine MDR1/P dans les cellules cancéreuses humaines [128], le rôle de l’expression différentielle des récepteurs tyrosine kinases (RTKs) et de l’activation de la voie de signalisation de l’IGF-I dans les léiomyomes utérins humains [129], le rôle anti-métastatique de décorine dans le cancer du sein [130], le rôle oncogénique de FGFR3 dans le cancer de la vessie [131].
Certains groupes ont utilisé les FBS de Sigma en culture cellulaire pour explorer différentes thérapies contre le cancer. Par exemple, Xie et al. ont utilisé le FBS de Sigma en culture cellulaire pour montrer que des cellules cancéreuses spécifiques pouvaient être ciblées par un circuit régulateur transcriptionnel/traductionnel synthétique [132]. Plus récemment, Ni Chonghaile et al. ont étudié l’effet de la chémothérapie avec amorçage mitochondrial élevé (mitochondrial priming) [21].
Les FBS de Sigma ont été utilisés pour étudier la structure et la fonction de la protéine membranaire CD81 [133], le rôle de la liaison de UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase/N-acetylmannosamine kinase (GNE) à l’alpha-actinine 1 dans le muscle squelettique [134], l’effet des penta peptides octanoyles sur la ghreline O-acyltransferase (GOAT) [135], l’effet d’augmenter l’expression des canaux perméables au calcium TRPC3 et TRPC7 sur la sécrétion constitutive [136], l’effet de FUSE Binding Protein sur la réplication du virus de l’Hépatite C [137], et la régulation de la concentration en ATP par les pyrophosphates d’inositol [138].
En 2008, Verma et al. a étudié l’expression de la protéine chaperonne ERp29 dans le modèlemurin de dégénération maculaire dépendante de l’âge (AMD), Ccl2-/-/Cx3cr1-/- [139]. Kowalski et al. ont étudié les effets de la stimulation de TLR2 et TLR4 sur la production de cytokines pro-inflammatoires par les PBMCs de patients avec une arthrite rhumatoïde récente [140]. Kami et al. ont étudié l’effet de la gremline sur la cardiomyogenèse [141].
Bansal et al. ont montré que l’expression de COX-2 and MMP-9 induite par PIM2 requiert PI3K et Notch1 dans les macrophages [142].
Parmi les publications revues, 9 citaient les produits Gemini. Hamanaka et al. ont étudié le rôle de pERK dans le stress du réticulum endoplasmique [147]. Kitareewan et al. ont étudié le rôle de G0S2 dans la réponse rétinoïque d’APL [148]. les FBS de Gemini ont été utilisés pour étudier l’activation des cellules T [149] et la réponse des cellules T CD8+ [150], le rôle de syndecan-1 dans la régulation de l’activation des intégrines alphaVbeta3 and alphaVbeta3 pendant l’angiogenèse et l’oncogenèse [116], l’influence des variants de HFE et du fer cellulaire sur la protéine MCP- [151], et la pathogenèse de l’infection de la peau [152].
Les différents produits FBS d’Atlanta Biologicals ont été utilisés pour étudier les effets bénéfiques et néfastes de l’interféron gamma lors d’une infection RSV secondaire [154], pour tester l’hypothèse que des mutations additionnelles de RAS en dehors des codons 12, 13, et 61 peuvent être responsables de l’oncogenèse dans les leucémies myéloïdes [155], pour démontrer que le dosage en CBP est un régulateur critique de l’effet inhibiteur de ER sur la signalisation de NFkappaB [156], et pour étudier le recrutement rapide de protéines de réparation de l’ADN par l’ADN chromosomal induit par l’alkylation dans des populations synchronisées de cellules HeLa MMR après traitement par MNNG [157].
PAA Laboratories fait partie de GE Healthcare.
Les produits FBS de PAA Laboratories ont été utilisés pour étudier la voie de signalisation de la mitogen-activated protein kinase (MAPK) dans le choriocarcinome humain [158], le rôle de CDC37 en concert avec HSP90 dans le maintien de protéines kinases oncogènes [159]. Burdak-Rothkamm et al. ont utilisé le FBS en culture cellulaire pour montrer qu’ATM agit en aval d’ATR dans la voie de signalisation impliquée dans la réponse aux dommages de l’ADN dans les cellules de Bystander [160]. Marschner et al. [161] et Sprynski et al. [162] ont également conduit des recherches en physiologie avec les produits FBS de PAA Laboratories.
Cardoso et al. ont utilisé le FBS pour étudier le rôle de la kinésine 5B dans les cellules cancéreuses [25], Avinoam et al. ont étudié la structure et la fonction d’AFF-1 (fusogènes cellulaires), un membre de la famille des protéines de fusion de C. Elegans [163].
Les produits FBS de PAN-Biotech GmbH ont été utilisés pour étudier le rôle des apo-lipoprotéines dans la synthèse et l’assemblage des particules virales de l’Hépatite C [164], pour identifier un progéniteur clonogénique de moelle osseuse spécifique pour les macrophages et cellules dendritiques [165], et pour montrer que le glucose sanguin chez la souris peut être contrôlé par un dispositif de transcription optogénétique synthétique [166].
Witherden et al. ont utilisé ces produits FBS pour étudier le rôle de la protéine JAML comme récepteur co-stimulateur pour l’activation des cellules T gammadelta [167]. Epting et al. ont montré que Sca-1 est localisé dans les microdomaines lipidiques dans les myoblastes squelettiques et s’associe avec le messager intracellulaire IDE [168].
Les FBS de plusieurs autres fournisseurs tels qu’Equitech-Bio, Biochrom, Lonza, Biowest, et Clontech ont également été cités.
Hussain et al. ont utilisé le FBS de Clontech pour montrer que l’hypoglycémie chez l’humain peut être causée par un mutant actif de AKT2 [169]. Nold-Petry et al. ont utilisé le FBS de Lonza pour étudier le rôle de IL-32 dans l’effet de IL-1 sur les fonctions des cellules endothéliales [170]. Hokaiwado et al. ont utilisé le FBS d’Equitech-Bio en culture cellulaire pour étudier le rôle de la glutathionne S-transférase Pi dans la prolifération des cellules de cancer de la prostate indépendante du récepteur aux androgènes [23]. Slipicevic et al. ont utilisé le FBS de Biochrom pour étudier le rôle de la protéine FABP7 dans la prolifération et l’invasion de cellules de mélanome [171]. Sato et al. ont utilisé le FBS de Biowest pour cultiver des neurones DRG de poulet pour démontrer que les projections axonales peuvent être régulées par la cartilage protéine acide -1B via l’inhibition de NgR1 [92].
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